用於分析醯基含量之方法有酸水解（Acid hydrolysis）、皂化（Saponification）、轉酯化（Transesterification）、分光光度法（Spectrophotometric）與胺解法（Aminolysis）等，其中最常用於生質物料者為酸水解法。該方法以經二階段之H2SO4水解程序將醯基從多醣體釋放出來，形成甲酸（Formic acid）與醋酸（Acetic acid），又由於五碳糖與六碳糖之降解產物糠醛（Furfural）與羥甲糠醛（Hydroxymethylfurfural，HMF），可在高溫與酸環境下形成甲酸，並產出果糖酸（Levulinic acid），故可由二階段H2SO4水解程序後之醋酸（Acetic acid）、甲酸（Formic acid）與果糖酸（Levulinic acid）等有機酸（Organic acid）含量，作為測定醯基含量之依據，其步驟如下：

• 前11步驟參照『醣含量』。
  
• 取高純度（98%＋）之醋酸（Acetic acid）、甲酸（Formic acid）與果糖酸（Levulinic acid）等有機酸（Organic acid）標準品，以去離子水調配醋酸、甲酸與果糖酸之系列濃度標準溶液，據以建立醋酸、甲酸與果糖酸之檢量線（Calibraton line）。若使用HPX-87H column，則可採用濃度0.02~0.5 mg/mL之醋酸、甲酸與果糖酸混合標準溶液，以建立醋酸、甲酸與果糖酸之檢量線。
  
• 取出水解溶液（Hydrolysis solution）至瓶中，予以激烈攪拌，直到進一步冷卻且固體物質沉澱下來。
  
• 以具0.2 µm濾片（Filter）之注射器（Syringe）過濾取樣。
  
• 利用標準醋酸、甲酸與果糖酸等有機酸之檢量線與HPLC測定濾液內之醋酸、甲酸與果糖酸等有機酸濃度（mg/mL）（Concentration of component in hydrolyzed sample C）。
  
• 計算樣品之待分析之有機酸含量：
  
  若樣品無須經備料程序（即直接以取得之樣品進行分析），則 %Tprep =100% 且%Tas received ＝%Tfinal。
  
• 若以不含萃取物（Extractives-free）之待測物樣品進行分析，則不含萃取物之樣品待分析之有機酸含量：
  至於萃取前物料樣品之待分析之有機酸含量，則以萃取後不含萃取物之樣品待分析之有機酸含量（% Analyteextractive-free）與萃取物含量（% Extractive）計算：

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