木質素（Lignin）為非晶體之高分子化合物，係由苯基丙烷（Phenyl propane）所組成之複雜結構物，與蛋白質及碳水化合物之化學性質不同，幾乎（並非全部）不溶於礦物酸（Mineral acids），難水解成單體，且在分離過程中，很容易引起縮合反應（Condensation reaction）。

         生質物料之酸不可溶木質素含量係指生質物料在歷經二階段H2SO4水解程序後殘留下來，經扣除酸不可溶灰分（Acid insoluble ash）後之物質。測量酸不可溶木質素含量之步驟如下：

• 前11步驟參照『醣含量』。
  
• 將準備用來過濾水解溶液（Hydrolysis solution）之過濾坩堝（Filtering crucible）置入高溫爐（Muffle furnace），於575±25ºC下灼燒（Ignite）至恆重，然後從烤箱移出，放入乾燥皿（Desiccator）備用並測量灼燒後（Ignited）之坩堝重量Wc。
  
• 利用灼燒後（Ignited）之過濾坩堝（Filtering crucible）過濾水解溶液，並以熱去離子水將沾黏在玻璃瓶內之任何殘留物沖入過濾坩堝，再以去離子水沖洗過濾殘渣去酸。
  
• 將過濾坩堝與坩堝內殘留物放入烤箱，於105±3ºC下烘烤2小時或至恆重，取出後放在乾燥皿上，冷卻至室溫，測量過濾坩堝與所承載之酸不可溶木質素（AIL）、酸不可溶灰分（Acid-insoluble ash）之總重Weight of the crucible, acid-insoluble lignin , and acid-insoluble ash W2。
  
• 將過濾坩堝與所承載之酸不可溶木質素（AIL）與酸不可溶灰分（Acid-insoluble ash）置入高溫爐，於575±25ºC下灼燒（Ignite）至少3小時或所有碳（Carbon）皆已消失。過程中加熱速度不宜過快以避免發火燃燒，若出現物料樣品即將發火，應儘速將容器部分掩蓋。
  
• 取出灼燒後之過濾坩堝，放在乾燥皿上，冷卻至室溫，測量過濾坩堝與所承載之酸不可溶灰分（Acid-insoluble ash）之總重Weight of the crucible and acid-insoluble ash W3。
  
• 計算酸不可溶木質素之重量：Weight of Acid-insoluble lignin WA＝W2－W3。
  
• 計算酸不可溶木質素含量： 
  % Acid-insoluble lignin＝
  若樣品無須經備料程序（即直接以取得之樣品進行分析），則%Tprep =100%且%Tas received ＝%Tfinal。
  若樣品於分析前，即於105ºC下乾燥備料，則%Tas received＝%Tprep且%Tfinal=100%。
  
• 若以不含萃取物（Extractives-free）之待測物樣品進行分析，則不含萃取物之樣品酸不可溶木質素含量： 。
  至於萃取前物料之不可溶木質素含量，則以萃取後不含萃取物之樣品酸不可溶木質素含量（% AILextractive-free ）與萃取物含量（% Extractive）計算：